2 Fragen zu Mikrodilutionstest

Beim Mikrodilutionstest handelt es sich um eine Methode zur Bestimmung der minimalen Hemmkonzentration (MHK) von antimikrobiellen Substanzen gegen Mikroorganismen. Dabei wird eine Reihe von Verdünnungen des antimikrobiellen Mittels in einer Mikrotiterplatte hergestellt und mit einer standardisierten Menge des zu testenden Mikroorganismus inokuliert. **Trübung** und **Klarheit** sind dabei wichtige Indikatoren: - **Trübung**: Eine trübe Lösung zeigt an, dass das Wachstum der Mikroorganismen nicht gehemmt wurde. Die Mikroorganismen vermehren sich und verursachen eine sichtbare Trübung der Lösung. Dies bedeutet, dass die Konzentration des antimikrobiellen Mittels in diesem Well (Vertiefung) nicht ausreicht, um das Wachstum der Mikroorganismen zu hemmen. - **Klarheit**: Eine klare Lösung zeigt an, dass das Wachstum der Mikroorganismen gehemmt wurde. Es gibt keine sichtbare Trübung, was bedeutet, dass die Konzentration des antimikrobiellen Mittels in diesem Well ausreicht, um das Wachstum der Mikroorganismen zu verhindern. Die MHK wird als die niedrigste Konzentration des antimikrobiellen Mittels definiert, bei der keine sichtbare Trübung (also Klarheit) beobachtet wird.

Der Mikrodilutionstest ist eine Methode zur Bestimmung der minimalen Hemmkonzentration (MHK) von antimikrobiellen Substanzen gegen Mikroorganismen. Hier ist eine Schritt-für-Schritt-Erklärung Verfahrens: 1. **Vorbereitung der Mikrotiterplatte**: Eine Mikrotiterplatte mit 96 Vertiefungen (Wells) wird verwendet. Jede Vertiefung enthält eine definierte Menge an Nährmedium. 2. **Verdünnungsreihe erstellen**: Eine Verdünnungsreihe der zu testenden antimikrobiellen Substanz wird in den Wells der Mikrotiterplatte erstellt. Dies geschieht durch serielle Verdünnung, bei der die Konzentration der Substanz von Well zu Well abnimmt. 3. **Inokulation**: Eine standardisierte Menge des zu testenden Mikroorganismus (z.B. Bakterien) wird in jede Vertiefung gegeben. Die Konzentration der Mikroorganismen wird oft auf eine bestimmte Dichte eingestellt, z.B. 10^5 bis 10^6 KBE/ml (koloniebildende Einheiten pro Milliliter). 4. **Inkubation**: Die Mikrotiterplatte wird für eine bestimmte Zeit (meist 18-24 Stunden) bei einer geeigneten Temperatur (meist 35-37°C) inkubiert. 5. **Auswertung**: Nach der Inkubation wird das Wachstum der Mikroorganismen in den Wells visuell oder durch Messung der Trübung (optische Dichte) bewertet. Die minimale Hemmkonzentration (MHK) ist die niedrigste Konzentration der antimikrobiellen Substanz, bei der kein sichtbares Wachstum des Mikroorganismus mehr zu beobachten ist. Der Mikrodilutionstest ist eine standardisierte Methode und wird häufig in der klinischen Mikrobiologie verwendet, um die Empfindlichkeit von Bakterien gegenüber Antibiotika zu testen.