Was ist die Totzeit bei der HPLC?

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Was ist die Totzeit bei der HPLC?

Antwort

Verwandte Fragen

Muss der pH-Wert neutral sein, um Tailing bei der HPLC zu vermeiden?

Aus welchen Wörtern setzt sich Chromatographie zusammen?

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Die Totzeit bei der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist die Zeit, die ein nicht-retardierter (nicht-wechselwirkender) Analyten benötigt, um durch die Säule zu gelangen und den Detektor zu erreichen. Diese Zeit wird auch als "t0" oder "tm" bezeichnet. Sie ist ein wichtiger Parameter, da sie als Referenzpunkt dient, um die Retentionszeiten anderer Analyten zu bestimmen und zu vergleichen. Die Totzeit kann durch die Injektion eines nicht-retardierten Markers, wie z.B. Uracil, bestimmt werden.

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Der pH-Wert der mobilen Phase spielt bei der HPLC (insbesondere bei der Reversed-Phase-HPLC) eine wichtige Rolle für die Peakform und kann das Auftreten von Tailing beeinflussen. Tailing entsteht... [mehr]

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Der pH-Wert der mobilen Phase spielt bei der HPLC (insbesondere bei der Reversed-Phase-HPLC) eine wichtige Rolle für die Peakform und kann das Auftreten von Tailing beeinflussen. Tailing entsteht häufig, wenn Wechselwirkungen zwischen ionisierbaren Analyten und aktiven Stellen auf der Säule (z. B. freie Silanolgruppen) auftreten. Ein eher neutraler pH-Wert (etwa zwischen 6 und 7) kann helfen, Tailing zu vermeiden, weil: - Viele Silanolgruppen auf der Silikaoberfläche bei neutralem pH weniger ionisiert sind, was die Wechselwirkungen mit basischen Analyten reduziert. - Starke Abweichungen vom neutralen pH (sowohl sauer als auch basisch) können die Silika-Säule schädigen oder die Ionisationszustände der Analyten so verändern, dass Tailing verstärkt wird. Allerdings ist der optimale pH-Wert immer abhängig von den chemischen Eigenschaften des Analyten. Für basische Verbindungen wird oft ein niedrigerer pH gewählt, um sie zu protonieren und Wechselwirkungen mit Silanolgruppen zu minimieren. Für saure Verbindungen kann ein höherer pH sinnvoll sein. **Fazit:** Ein pH-Wert im neutralen Bereich kann helfen, Tailing zu vermeiden, ist aber nicht immer zwingend erforderlich. Entscheidend ist, dass der pH-Wert so gewählt wird, dass der Analyte in einer Form vorliegt, die möglichst wenig mit aktiven Stellen der Säule interagiert. Die Wahl des optimalen pH-Werts hängt also vom Analyten und der Säule ab.

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Das Wort „Chromatographie“ setzt sich aus den griechischen Wörtern „chroma“ (χρῶμα) für „Farbe“ und „graphein“ (γρά... [mehr]

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Das Wort „Chromatographie“ setzt sich aus den griechischen Wörtern „chroma“ (χρῶμα) für „Farbe“ und „graphein“ (γράφειν) für „schreiben“ oder „zeichnen“ zusammen. Wörtlich bedeutet es also „Farbschreiben“ oder „Farbaufzeichnung“.