Der Hauptstimulus für die Freisetzung von Glucagon ist ein niedriger Blutzuckerspiegel (Hypoglykämie). Wenn der Blutzuckerspiegel sinkt, wird Glucagon von den Alpha-Zellen der Bauchspeicheldrüse freigesetzt. Weitere Faktoren, die die Glucagonfreisetzung beeinflussen können, sind erhöhte Aminosäurekonzentrationen im Blut, Stresshormone wie Adrenalin und die Aktivität des sympathischen Nervensystems. Glucagon wirkt, indem es die Glykogenolyse (Abbau von Glykogen zu Glukose) in der Leber fördert und die Glukoneogenese (Neubildung von Glukose) anregt, um den Blutzuckerspiegel zu erhöhen.