Was ist der Unterschied zwischen whole cell und perforated cell Messung im Patch clamp?

Antwort

In der Patch-Clamp-Technik gibt es verschiedene Konfigurationen, um die elektrische Aktivität von Zellen zu messen. Zwei häufig verwendete Methoden sind die Whole-Cell-Messung und die Perforated-Patch-Messung. Hier sind die Hauptunterschiede: 1. **Whole-Cell-Messung:** - **Zellmembranruptur:** Bei dieser Methode wird die Zellmembran unter der Patch-Pipette absichtlich rupturiert, um einen direkten Zugang zum Zellinneren zu erhalten. - **Intrazelluläre Lösung:** Die Pipettenlösung vermischt sich mit dem Zytoplasma der Zelle, was eine genaue Kontrolle der intrazellulären Umgebung ermöglicht. - **Vorteile:** Ermöglicht die Messung des gesamten Zellstroms und die Manipulation der intrazellulären Zusammensetzung. - **Nachteile:** Kann zu einem Verlust von zellulären Bestandteilen und einer Veränderung der Zellphysiologie führen. 2. **Perforated-Patch-Messung:** - **Perforation der Membran:** Anstatt die Membran zu rupturieren, wird ein perforierendes Mittel (z.B. Antibiotika wie Amphotericin B oder Nystatin) verwendet, um kleine Poren in der Membran zu erzeugen. - **Erhalt der Zellintegrität:** Diese Poren ermöglichen den Ionenfluss, ohne dass die Pipettenlösung das Zytoplasma vollständig durchmischt. Dadurch bleibt die intrazelluläre Umgebung weitgehend intakt. - **Vorteile:** Erhält die natürliche Zellphysiologie besser und minimiert den Verlust von zellulären Bestandteilen. - **Nachteile:** Die elektrische Zugänglichkeit ist möglicherweise nicht so gut wie bei der Whole-Cell-Messung, und die Methode kann technisch anspruchsvoller sein. Beide Methoden haben ihre spezifischen Anwendungen und Vorteile, abhängig von den experimentellen Anforderungen und den zu untersuchenden zellulären Prozessen.

Kategorie: Wissenschaft Tags: Patch Clamp Cell
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