siRNAs (small interfering RNAs) werden verwendet, um die Expression spezifischer Gene in Zebrafischen zu reduzieren oder "herunterzufahren" (Knockdown). Der Prozess umfasst mehrere Schritte: 1. ** der siRNA**: Die siRNA wird so entworfen, dass sie komplementär zu der mRNA des Zielgens ist. Dies erfordert eine sorgfältige Auswahl der siRNA-Sequenz, um Off-Target-Effekte zu minimieren. 2. **Synthese der siRNA**: Die ausgewählte siRNA-Sequenz wird chemisch synthetisiert oder in vitro transkribiert. 3. **Mikroinjektion**: Die siRNA wird in die Zebrafisch-Embryonen injiziert. Dies geschieht typischerweise in das Ein-Zell-Stadium oder in frühe Embryonalstadien, um eine gleichmäßige Verteilung der siRNA zu gewährleisten. 4. **Knockdown-Effekt**: Nach der Injektion bindet die siRNA an die komplementäre mRNA des Zielgens und induziert deren Abbau oder blockiert deren Translation. Dies führt zu einer Reduktion der Proteinproduktion des Zielgens. 5. **Analyse**: Die Effizienz des Knockdowns wird durch verschiedene Methoden überprüft, wie z.B. qPCR zur Messung der mRNA-Spiegel oder Western Blot zur Messung der Proteinspiegel. Diese Methode ermöglicht es Forschern, die Funktion spezifischer Gene in der Entwicklung und Physiologie von Zebrafischen zu untersuchen.