Gelbfieber wird hauptsächlich durch den Stich von infizierten Mücken übertragen, insbesondere von der Art Aedes aegypti. Diese Mücken sind vor allem in tropischen und subtropischen Regionen verbreitet. Die Übertragung erfolgt, wenn eine Mücke das Virus von einer infizierten Person auf eine gesunde Person überträgt. Es gibt auch seltene Fälle, in denen das Virus durch Bluttransfusionen, Organtransplantationen oder von einer schwangeren Frau auf ihr Kind übertragen werden kann.