Wie entsteht ein PCR-Produkt definierter Größe?

Antwort

Ein PCR-Produkt definierter Größe entsteht durch den Prozess der Polymerase-Kettenreaktion (PCR), der es ermöglicht, spezifische DNA-Abschnitte zu amplifizieren. Hier sind die Schritte, die zu einem PCR-Produkt definierter Größe führen: 1. **Primer-Design**: Zunächst werden spezifische Primer entworfen, die an die Ziel-DNA binden. Diese Primer flankieren den gewünschten DNA-Abschnitt und bestimmen somit die Größe des PCR-Produkts. 2. **Denaturierung**: Die DNA wird erhitzt, um die Doppelhelix zu trennen, sodass die Einzelstränge zugänglich sind. 3. **Annealing**: Die Temperatur wird gesenkt, damit die Primer an die komplementären Sequenzen der Einzelstränge binden können. 4. **Elongation**: Eine DNA-Polymerase synthetisiert neue DNA-Stränge, indem sie Nukleotide an die gebundenen Primer anfügt. Die Polymerase arbeitet von den Primern aus in Richtung des Ziel-DNA-Abschnitts. 5. **Zyklenwiederholung**: Dieser Prozess wird in mehreren Zyklen wiederholt (typischerweise 25-35 Zyklen), wodurch die Ziel-DNA exponentiell amplifiziert wird. Die Größe des PCR-Produkts ist also definiert durch die Position der Primer und die Länge des DNA-Abschnitts zwischen ihnen. Durch die Verwendung von Gel-Elektrophorese kann die Größe des PCR-Produkts überprüft werden.

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