Ein TOPFLASH-Assay ist ein biochemischer Test, der verwendet wird, um die Aktivität des Wnt/β-Catenin-Signalwegs zu messen. Dieser Signalweg spielt eine wichtige Rolle in der Zellproliferation, Differenzierung und Entwicklung. Der Assay basiert auf einem Reportergen, das unter der Kontrolle von TCF/LEF-Bindungsstellen steht, die durch β-Catenin aktiviert werden. Im TOPFLASH-Assay wird eine Plasmid-DNA, die das Reportergen (meistens Luciferase) enthält, in Zellen transfiziert. Wenn der Wnt/β-Catenin-Signalweg aktiviert wird, bindet β-Catenin an TCF/LEF-Transkriptionsfaktoren und aktiviert die Transkription des Reportergens. Die Aktivität des Reportergens kann dann durch die Messung der Luciferase-Aktivität quantifiziert werden, was einen indirekten Hinweis auf die Aktivität des Wnt/β-Catenin-Signalwegs gibt. Weitere Informationen zum Wnt/β-Catenin-Signalweg und TOPFLASH-Assay können in wissenschaftlichen Publikationen und spezialisierten Biochemie-Lehrbüchern gefunden werden.