Im rauen endoplasmatischen Retikulum (ER) wird Präproinsulin in Proinsulin umgewandelt. Dabei wird das Signalpeptid, das am N-terminalen Ende des Präproinsulins vorhanden ist, während der Translation abgespalten. Das verbleibende Proinsulin wird dann in das Lumen des rauen ER transportiert, wo es gefaltet und modifiziert wird, bevor es in den Golgi-Apparat weitergeleitet wird.