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Wie funktioniert der Edman-Abbau?
Antwort vomDer Edman-Abbau ist eine biochemische Methode zur Sequenzierung von Aminosäuren in Proteinen. Dabei wird die N-terminalen Aminosäure eines Peptids schrittweise abgetrennt und identifiziert. Der Prozess funktioniert in mehreren Schritten: 1. **Reaktion mit Phenylisothiocyanat (PITC)**: Das Peptid wird mit PITC behandelt, was eine Reaktion mit der N-terminalen Aminosäure eingeht und ein Phenylthiocarbamyl (PTC)-Peptid bildet. 2. **Hydrolyse**: Das PTC-Produkt wird dann in einer sauren Lösung hydrolysiert, wodurch die N-terminale Aminosäure als Phenylthiohydantoin (PTH)-Aminosäure freigesetzt wird. 3. **Identifikation**: Die PTH-Aminosäure kann durch chromatographische Methoden, wie Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC), identifiziert werden. 4. **Wiederholung**: Der Prozess wird wiederholt, wobei das verbleibende Peptid erneut behandelt wird, um die nächste N-terminale Aminosäure zu bestimmen. Durch diese schrittweise Abtrennung und Identifizierung kann die gesamte Sequenz eines Peptids oder Proteins ermittelt werden. Der Edman-Abbau ist besonders nützlich für die Analyse von kurzen Peptiden, da die Effizienz mit zunehmender Länge des Peptids abnimmt.
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