Wie interpretiert man der(8)t(8;11) durch FISH-Analyse mit Sonden?

Antwort

Die t(8;11)-Translokation ist eine chromosomale Anomalie, die durch den Austausch von genetischem Material zwischen Chromosom 8 und Chromosom 11 gekennzeichnet ist. Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) ist eine Technik, die verwendet wird, um spezifische DNA-Sequenzen in Chromosomen zu visualisieren und zu identifizieren. Um die t(8;11)-Translokation durch FISH-Analyse zu interpretieren, werden spezifische Sonden verwendet, die an die Regionen auf Chromosom 8 und Chromosom 11 binden, die an der Translokation beteiligt sind. Hier ist eine allgemeine Vorgehensweise: 1. **Vorbereitung der Proben**: Zellen werden auf einem Objektträger fixiert und die DNA wird denaturiert, um die Sonden binden zu lassen. 2. **Hybridisierung**: Fluoreszenzmarkierte Sonden, die spezifisch für die Regionen auf Chromosom 8 und Chromosom 11 sind, werden auf die denaturierte DNA aufgebracht. Diese Sonden binden an ihre komplementären DNA-Sequenzen. 3. **Waschen und Färben**: Überschüssige Sonden werden abgewaschen und die Proben werden gefärbt, um die Chromosomen sichtbar zu machen. 4. **Mikroskopische Analyse**: Unter einem Fluoreszenzmikroskop werden die Proben analysiert. Die Sonden fluoreszieren in unterschiedlichen Farben, was es ermöglicht, die Positionen der spezifischen DNA-Sequenzen zu visualisieren. 5. **Interpretation**: - **Normaler Befund**: Wenn keine Translokation vorliegt, werden die Sonden auf Chromosom 8 und Chromosom 11 getrennt voneinander fluoreszieren. - **Translokation t(8;11)**: Wenn die Translokation vorliegt, werden die Sonden von Chromosom 8 und Chromosom 11 in der Nähe voneinander oder überlappend fluoreszieren, was auf den Austausch von genetischem Material hinweist. Die genaue Interpretation hängt von der spezifischen Anordnung und den Farben der Fluoreszenzsignale ab. Ein erfahrener Zytogenetiker kann diese Signale analysieren und feststellen, ob die t(8;11)-Translokation vorliegt.

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