1 Frage zu Transaminase

Die Aktivitätsbestimmung der Glutamat-Oxalacetat-Transaminase (GOT), auch bekannt als Aspartat-Aminotransferase (AST), erfolgt typischerweise durch enzymatische Assays, die die Umwandlung von Aspartat und α-Ketoglutarat in Glutamat und Oxalacetat messen. Hier sind die grundlegenden Schritte zur Bestimmung der Aktivität: 1. **Probenvorbereitung**: Entnehme eine biologische Probe (z.B. Serum oder Gewebe) und bereite sie entsprechend vor, um die Enzymaktivität zu messen. 2. **Reaktionsmischung**: Stelle eine Reaktionsmischung her, die Aspartat, α-Ketoglutarat, Puffer (z.B. Tris-HCl) und gegebenenfalls Co-Faktoren (wie Pyridoxalphosphat) enthält. 3. **Inkubation**: Führe die Reaktion unter kontrollierten Bedingungen (Temperatur, pH) durch. Die Inkubationszeit kann variieren, typischerweise zwischen 30 Minuten und 1 Stunde. 4. **Stoppen der Reaktion**: Stoppe die Reaktion durch Zugabe eines Stopplösungsmittels oder durch Abkühlen. 5. **Messung**: Bestimme die Konzentration von Glutamat oder Oxalacetat in der Reaktionsmischung, häufig durch spektrophotometrische Methoden. Die Änderung der Absorption wird genutzt, um die Enzymaktivität zu quantifizieren. 6. **Berechnung**: Berechne die Enzymaktivität basierend auf der Änderung der Substrat- oder Produktkonzentration über die Zeit. Die GOT-Aktivität wird häufig in internationalen Einheiten pro Liter (U/L) angegeben. Diese Methode ist wichtig in der klinischen Diagnostik, insbesondere zur Beurteilung von Leber- und Herzschäden.