In "Spider-Man: No Way Home" sind die Hauptcharaktere Peter Parker (gespielt von Tom Holland), Doctor Strange (Benedict Cumberbatch) und Versionen von Spider-Man, darunter Tobey Maguire und Andrew Garfield, die aus anderen Universen zurückkehren. Auch Figuren wie MJ (Zendaya) und Ned Leeds (Jacob Batalon) wichtige Rollen in der Handlung.