Welche Methoden gibt es zur Bestimmung der Proteinkonzentrationen?

Es gibt mehrere Methoden, um Proteinkonzentrationen zu bestimmen. Hier sind einige der gängigsten:

1. **Bradford-Assay**: Diese Methode basiert auf der Bindung des Coomassie-Brillant-Blau-Farbstoffs an Proteine. Die Farbänderung wird spektrophotometrisch bei 595 nm gemessen.

2. **Bicinchoninsäure (BCA)-Assay**: Diese Methode verwendet die Reduktion von Cu²⁺ zu Cu⁺ durch Proteine in alkalischer Lösung, gefolgt von der Bildung eines farbigen Komplexes mit Bicinchoninsäure, der bei 562 nm gemessen wird.

3. **Lowry-Assay**: Diese Methode kombiniert die Reaktion von Proteinen mit Kupferionen in alkalischer Lösung und die Folin-Ciocalteu-Reaktion, die eine Farbänderung erzeugt, die bei 750 nm gemessen wird.

4. **UV-Absorptionsmethode**: Proteine absorbieren UV-Licht bei 280 nm aufgrund der aromatischen Aminosäuren Tryptophan und Tyrosin. Diese Methode erfordert keine Farbstoffe oder Reagenzien.

5. **Kjeldahl-Methode**: Diese Methode misst den Stickstoffgehalt in einer Probe, der dann zur Berechnung der Proteinkonzentration verwendet wird. Sie ist sehr genau, aber auch zeitaufwendig und erfordert spezielle Ausrüstung.

6. **Fluoreszenz-basierte Methoden**: Diese Methoden nutzen fluoreszierende Farbstoffe, die spezifisch an Proteine binden und deren Fluoreszenzintensität gemessen wird.

Jede dieser Methoden hat ihre eigenen Vor- und Nachteile, und die Wahl der Methode hängt oft von der spezifischen Anwendung und den verfügbaren Ressourcen ab.